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domingo, 21 de septiembre de 2014

IDENTIFICACIÓN MOLECULAR DE Bordetella spp. (AGENTE CAUSAL DE TOS FERINA) POR PCR EN TIEMPO REAL

IDENTIFICACIÓN MOLECULAR DE Bordetella spp. (AGENTE CAUSAL DE TOS FERINA) POR PCR EN TIEMPO REAL

Moisés Noriega Bautista1*, Luis Román Ramírez Palacios2, Delia Anatolia Cuevas Aguirre3. Rosalva Martínez García3 y Jacobo Montes Yedra3
1Residente de la Licenciatura en Biología del Instituto Tecnológico del Valle de Oaxaca (ITVO), Ex-Hacienda de Nazareno Xoxocotlán, Oaxaca, México
2Jefe del Área de Virología y Biología Molecular del Laboratorio Estatal de Salud Pública de Oaxaca (LESPO), Carretera Oaxaca-Sola de Vega km 18.5, Reyes Mantecón, San Bartolo Coyotepec, Oaxaca, México
3Profesor-Investigador del ITVO, Oaxaca, México
*Autor para correspondencia: moynoba@hotmail.com

RESUMEN

En el presente estudio se implementó un método de diagnóstico molecular para la detección de la tos ferina que permite identificar el agente etiológico involucrado, se analizaron 111 muestras (19 casos sospechosos de tos ferina y 92 contactos de caso) durante marzo-julio de 2013. Se extrajeron ácidos nucleicos totales (QIAamp DNA mini-kit, QIAGEN) y se sometieron al protocolo multiplex (IS481, plS1001, hlS1001) y simplex (ptxS1) para la identificación de Bordetella spp (Tatti et al., 2011) por qPCR, técnica por la cual en los casos se obtuvieron cinco muestras positivas (cuatro directamente por qPCR y uno por asociación epidemiológica se consideró positiva). En los contactos se encontraron seis muestras positivas, dos muestras indeterminadas. Las muestras positivas a Bordetella pertussis se distribuyeron en diferentes localidades del Estado de Oaxaca, tales como San Jacinto Amilpas, Tuxtepec, Loma Bonita, Juchitán, San José Chiltepec y Santa María Chicometepec. Con respecto a las muestras positivas por qPCR el 50% corresponden a hombres y el 50% corresponden a mujeres. Los resultados del presente estudio mostraron la circulación de B. pertussis en Oaxaca, lo que confirma la importancia de que el programa de vacunación universal establezca estrategias adecuadas que permitan una cobertura del 100% en la población infantil. Se confirmó la presencia de B. pertussis como agente causal de tos ferina en el estado, utilizando un método altamente sensible y específico.


Palabras clave: Bordetella pertusis, PCR, tos ferina. 

domingo, 7 de septiembre de 2014

IDENTIFICACIÓN DE Leptospirainterrogans POR PCR EN TIEMPO REAL

IDENTIFICACIÓN DE Leptospirainterrogans POR PCR EN TIEMPO REAL

1*Jeidy Aparicio Cuevas, 2Jacobo Montes Yedra,3Luis Román Ramírez Palacios,2Delia Anatolia Cuevas Aguirre,2Judith Ruiz Luna.
1Residente de la Licenciatura en Biología del Instituto Tecnológico del Valle de Oaxaca (ITVO), Oaxaca,
México
2 Profesor e investigador del ITVO, Nazareno, Xoxocotlán, Oaxaca, México
3Jefe del área de virología y biología molecular.Laboratorio Estatal de Salud Pública de Oaxaca(LESPO), Oaxaca, México
*Autor para correspondencia:jeidy.aparicio@hotmail.com

RESUMEN

 

La leptospirosis es una zoonosis con una amplia distribución mundial. También conocida como la enfermedad de Weil, de los cañaverales, fiebre de los arrozales o fiebre de los porqueros, es causada por bacterias del géneroLeptospira, que afecta a los animales domésticos y a la fauna silvestre los que frecuentemente se transforman en portadores asintomáticos. Dado a que no existen estudios realizados en el Estado deOaxacase desconocerealmente el alcance que esta enfermedad tiene en la población,recientemente se han desarrollado técnicas convencionales para la detección de la leptospirosis presentando desventajas para obtener un resultado preciso y confiable, por lo que en el presente estudio se validó la técnica de PCR en tiempo realpara la determinaciónde Leptospirainterrogansen muestras séricas provenientes de las seis jurisdicciones sanitarias del Estado de Oaxaca obteniendo un total de 76 muestras de la cual el9.21% fueron confirmados casos positivos de leptospirosis, determinando tresjurisdicciones sanitarias afectadas, sin presentar una diferencia significativa en el género y rango de edad de la población estudiada, con características sintomatológicas del 100%.Identificación de Leptospirainterrogans en muestras séricas provenientes de las jurisdicciones sanitarias del estado mediante la técnica de PCR en tiempo real.

 

Palabras clave:Leptospirainterrogans, leptospirosis,PCR en tiempo real, zoonosis



domingo, 17 de agosto de 2014

DETECCIÓN DE Rickettsia spp POR RT-PCRE INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA EN MUESTRAS SEROLÓGICAS

DETECCIÓN DE Rickettsia spp POR RT-PCRE INMUNOFLUORESCENCIA
INDIRECTA EN MUESTRAS SEROLÓGICAS

Javier García Gallardo1*, Judith Ruiz Luna2, Luis Román Ramírez Palacios3, Clotilde Rafael Aragón2, Rosalva Martínez García2
1. Residente de la Licenciatura en Biología del Instituto Tecnológico del Valle de Oaxaca (ITVO), Nazareno Xoxocotlán, Oaxaca.
2. Profesora investigadora del ITVO, Nazareno Xoxocotlán, Oaxaca.
3. Jefe del área de Virología y Biología Molecular del Laboratorio Estatal de Salud Pública de Oaxaca (LESPO), Reyes Mantecón, Carretera Oaxaca – Sola de Vega km 18.5, C.P. 71257
*Autor correspondencia: profanador602@hotmail.com

RESUMEN

Detectar la presencia de Rickettsia spp en muestras serológicas descartadas para fiebre hemorrágica por dengue a través de las técnicas de RT-PCR e inmunofluorescencia indirecta (IFI). Se usaron únicamente muestras de suero de las seis jurisdicciones de Oaxaca, por lo cual se evaluaron mediante su ensayo correspondiente. Por PCR se extrajeron templados para la amplificación. Con la IFI, se prepararon diferentes diluciones, para determinar anticuerpos de tipo IgM contra las Rickettsias. Se analizaron un total de 57 muestras para diagnóstico y diferenciales, de las cuales se obtuvieron 18 positivos para Rickettsiosis, nueve son coinfecciones entre el género, cuatro de estas coinfecciones presentaron el virusdel dengue. El grupo de edad más afectado es el de 11 a 15 años, el género más representativo fue el femenino, la jurisdicción más afectada es la cuatro. Al ser una enfermedad emergente, se hace relevante realizar análisis para su detección, para PCR se sugiere sangre total para detectar el ADN bacteriano, sin dejar a un lado el suero. Siendo los primeros casos encontrados en el estado y posiblemente en el país con presencia de coinfecciones en el Estado de Oaxaca, se hace importante el diagnóstico de la enfermedad, así también realizar ensayos diferenciales para dengue.

Palabras Clave: Rickettsia, Fiebre de las Montañas Rocosas, Tifo murino,Coinfección, vectores.


domingo, 6 de julio de 2014

IMPLEMENTACIÓN DE LA TÉCNICA DE INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA COMO PRUEBA CONFIRMATORIA PARA Trypanosomacruzi EN EL LESPO

IMPLEMENTACIÓN DE LA TÉCNICA DE INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA COMO PRUEBA CONFIRMATORIA PARA Trypanosomacruzi EN EL LESPO

1Adriana Ramírez Cosmes,2Jacobo Montes Yedra,3Yuridia Trejo López, 2Delia Anatolia Cuevas Aguirre, 2Judith Ruíz Luna.
1 Residente de la Licenciatura en Biología en el Instituto Tecnológico del Valle de Oaxaca (ITVO), Oaxaca, México.
2 Profesor e investigador del ITVO, Nazareno, Xoxocotlán, Oaxaca México.
3 Analista en el laboratorio de parasitología en el Laboratorio Estatal de Salud Pública de Oaxaca (LESPO), Oaxaca, México.
*Autor para correspondencia: adrii.raco@hotmail.com

RESUMEN

La enfermedad de Chagas es producida por el parásito Trypanosomacruzi (T. cruzi). Es una enfermedad de importancia en salud pública en Latinoamérica la cual consta de tres fases: aguda, indeterminada y crónica, su diagnóstico depende de la fase en la que se encuentre el paciente. Las técnicas serológicas son empleadas durante las fases indeterminada y crónica, de las cuales se deben realizardos métodos de principios diferentes y recurrir a un tercero en caso de no coincidir estos en los resultados. Se implementó y estandarizó la técnica de Inmunofluorescenciaindirecta en el Laboratorio de Parasitología del LESPO el cual cuenta con solo dos métodos, tomando como referencia el procedimiento establecido por elInDRE, logrando con esto la reducción de costos por envíos de muestras discordante a este laboratorio y lograr la dependencia diagnóstica. Se procesaron con la técnica de IFI un total de 50 sueros obteniendo un 96% de concordancia comparados con los resultados obtenidos por el InDRE.


Palabras clave: anticuerpos, chagas, salud pública, serología.